A . 分离和培养待测细胞
B . 染色与分析：用荧光素标记的细胞因子特异性单克隆抗体做荧光抗体染色
C . 封闭非特异性结合位点
D . 细胞固定：多为4%多聚甲醛
E . 不同荧光素标记两种以上细胞因子的单克隆抗体，不能同时检测同一细胞内2种以上不同细胞因子