女，13岁，发热伴右大腿疼痛2周，查体：精神萎靡，患肢呈半屈曲位，皮温高，右大腿远端有压痛。WBC14×10/L，中性粒细胞占90%，股骨正侧位X线片可见干骺端骨质疏松及层状骨膜反应。为明确诊断，最有意义的检查是

A.血细菌培养

B.化验血沉

C.化验血常规

D.局部分层穿刺

E.化验血碱性磷酸酶